文 | 科志康 原创 | 布洛芬、硫酸盐

作为疫苗产业的新星——mRNA疫苗，其生产工艺简单、无需细胞培养或动物源基质、合成速度快、成本低。相比同属核酸疫苗的DNA疫苗，mRNA疫苗无需进入细胞核才能发挥作用，因此没有整合至宿主基因组的风险，另外mRNA疫苗不带有病毒成分，没有感染风险。此外，mRNA疫苗的研发周期短，能够快速开发新型候选疫苗应对病毒变异；同时还具有体液免疫及T细胞免疫双重机制，免疫原性强，不需要佐剂以及易于批量生产，有支持全球供应的关键优势。

目前国内外仅有2款产品成功上市，分别是辉瑞/BioNtech与Moderna公司研发的新冠疫苗Comirnaty与Spikevax。因此本文将对这两种产品结合法规文件进行CMC部分的案例解读，以供参考。

已批准上市mRNA产品：

mRNA生产流程：

首先第一步是获取病原体的基因组测序，再将编码抗原的序列插入到质粒DNA（pDNA）中，并利用大肠杆菌制备得到高纯线性pDNA；接下来的第二步是使pDNA在体外通过RNA聚合酶转录成mRNA，并对mRNA进行3’端的加帽和5‘端的加尾，然后对mRNA原液进行纯化去除污染物、酶、游离核苷酸等杂质；第四步是将制剂与载体结合。第五步，利用透析或过滤的方法除去非水溶剂和未经载体封装的mRNA；最后将过滤得到的mRNA疫苗封装在无菌小瓶中，疫苗的生产之旅就结束了。

mRNA的质量控制：

结合CDE发布的《新型冠状病毒预防用mRNA疫苗药学研究技术指导原则（试行）》以及美国药典发布的新指南草案“mRNA疫苗质量分析方法”，针对mRNA生产阶段所需进行质量控制进行整理可供参考。

CMC共性问题：

从目前已公布的资料中，我们也能发现一些在CMC阶段中共性的问题（整理如下），特别是在原辅料、生产用设备机构等等，这些问题在不少药企的研究阶段都会面临，因此需要格外注意。

原料、辅料的选择：

• 避免使用人源或动物源的材料，要进行TSE、BSE风险评估

• 制备过程中使用的原材料均来来自批准认证的供应商，并根据申请人的内部质量控制计划进行测试和放行。

• 对于药典所记载的材料，按照现行药典对材料进行了测试和放行；而所有非药典记载的起始原材料都需有代表性的分析证书(CoA)或符合性证书支持。（以Comirnaty为例如下图所示）

• 如果多个供应商的DS中间体和DS生产工艺中使用的所有非药典记载的原料都符合在申请人自主建立的相应主质量标准，那么申请人就不需对这些属性进行重新测试。但是，作为进货原材料质量检验的一部分，至少要在每个生产现场对每种原材料的特性进行检测。

  

设备、机构：

• 用于制造和测试CX-024414 mRNA的设备所在机构都符合cGMP标准，并拥有美国FDA机构许可证。

• 要评估设备系统的安全风险性

制剂生产日期：

• Comirnaty：最终药品的生产日期不晚于最终无菌过滤日期

• SPIKEVAX：最终药品的生产日期将是灌装时最后一次无菌过滤的日期。

环境风险评估：

• 药理学活性部分或共体中的DS是信使RNA (mRNA)，其被认为是天然存在的。疫苗产品的治疗用途不会显著改变环境中mRNA、其代谢物或降解产物的浓度或分布。

• 磷脂(DSPC)和甾醇脂质(胆固醇)都被认为是天然存在的膜脂质，因此，使用疫苗产品不会显著改变这些脂质、其代谢物或降解产物在环境中的浓度或分布。

放行检测项目：

• 二者都共有的放行检测项目包括产品外观、脂质各组分含量、鉴定（RNA序列的一致性）、内毒素、无菌、容器封闭完整性。